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生物知識

細胞為什么容易污染

作者:admin 來源:本站 發布時間: 2019-06-02 16:49  瀏覽次數:
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 不出意外,我的細胞又污染了。呃,確切地說,已經是我第四次污染細胞了(總共五次),這是第六次細胞培養。希望這次能順利長好細胞!

 

 

 

實際上大概問題出在下面幾點:

 

1)穿戴一時爽,細胞白培養

  

 

進細胞房不換鞋,不戴口罩,不戴手套,雖然感覺挺爽呼吸暢快,但其實是細胞房的大忌諱!有更嚴格的細胞房連帽子都要戴上。為什么呢?換鞋就不說了,你應該也知道有真菌吧。但你根本不能保證你口腔支原體是不是會污染細胞,每當你哈一口氣給細胞送溫暖的時候,細胞就……呵呵了。不戴手套,根本就清除不掉你手上的細菌真菌,要不你試試看拿火燎一下你的手,焦了才算滅菌。

 

2)紫外和酒精,亂用也不靈

 

 紫外和酒精能滅菌……嗎?沒錯,能滅菌,但是紫外和酒精最多只能滅細菌,對真菌傷害很小。你不戴手套,可勁用噴壺噴手是沒有什么卵用的。超凈臺為什么盡量要用酒精棉球而不是用酒精噴壺呢?因為用酒精棉球的話,可以在滅菌的同時把菌體從手上擼下去。而噴壺只能短暫滅菌而已,所以要多用棉球,少用噴壺。

 

3)生物安全柜,別超三八線 

 

 生物安全柜的玻璃窗是有警戒線的,超過這個警戒線,生物安全柜的風簾就起不到太大作用,而且會引入室內空氣中的真菌,比如你的臭鞋里的酵母啥的。還會讓你給細胞送溫暖的呼吸里,自動帶上支原體。

 

4)拿瓶不拿蓋,拿蓋污染快

                                                                                                                      

 

 用細胞培養瓶來培養的時候,最最忌諱的是啥?是你拿瓶子的時候,手拿著有蓋子的那一面?為啥,因為一般來說瓶蓋開關是最容易接觸到瓶口的,你手拿著培養瓶,那手的虎口夾縫里所含有的真菌很容易就接觸到瓶蓋上,一旦造成污染,就是很嚴重的。

 

5)門前堆得多,霉菌找到窩 

 

 生物安全柜里操作的時候,門前最忌諱堆一堆雜七雜八的東西,你看看你,槍頭盒、血清、管子,培養皿、移液器、酒精噴壺、酒精燈,堆了一大堆。有的都堵住了你門前的出風口。一來你操作起來并不是井井有條,會導致動作幅度過大,擾亂氣流。二來這些東西一旦擋住風口,也會擾亂生物安全柜的氣流,氣流變化會導致外部不潔凈的空氣流入,也同樣會導致生物安全柜的潔凈作用失效。這必須要注意!

 

6)清潔水浴鍋,否則雜菌多

 

 

 水浴鍋是比較容易忽視的,你說你復蘇細胞的時候,37℃,對細菌真菌來說這就是溫床啊。復蘇完,濕漉漉的凍存管,任你再怎么噴酒精也并沒有什么意義了。那要怎么辦,水浴鍋一來是定期清潔,二來是加一些抑菌劑。別別別,不是讓你往里面加雙抗!水浴鍋里要加2%的硫酸銅,但這個是比較容易腐蝕水浴鍋的,所以定期也要更換清潔。

 

7)水盤要污染,一箱全玩完

 

 

 剛才說了水浴鍋了,那接下去講講另一個坐擁37℃溫床的水環境,也就是培養箱的水盤。有幾次我都看到水盤里飄著特別大的一塊塊霉斑。這孢子,是你不敢想象的。一污染就一箱子全報廢了,培養箱要定期用0.1%的新潔爾滅或者84清洗(交替使用,防止微生物耐藥)。水盤也一樣,水盤中加入飽和的磷酸氫二鈉可以有效預防細菌真菌,但是需要定期加入去離子水防止析出。

 

8)滅菌滅不好,污染隨時找

                                                                                                                        

 

細胞房所使用的槍頭,必須要經過濕熱滅菌,但你看你,濕熱滅菌的槍頭都沒用報紙包好,不包好也就算了,滅完菌還不烤干!用報紙包裹好槍頭,是因為滅菌鍋一般在細胞房外面,所以要保證內部槍頭盒結晶。烤干是為了防止內部有水分,當你開啟槍頭盒后,有水的地方更容易被霉菌的孢子所接觸附著,也就更容易污染。所以這個也必須要注意!

 

9)激情移液器,污染灑滿地

 

 

 

 

你用移液器的時候,吸液這么猛力果斷,必然會把培養基或者細胞沾到移液器的口上。培養基這種東西,就是微生物的溫床啊。不弄干凈,下次再這么激情地用移液器,必然要污染,這個必須每次使用后,用75%的乙醇,或者5%的硫酸銅,或者0.1%的新潔爾滅來擦一下的。這樣可以防止一些污染。

 

好了,說了這么多,這些就是你在操作的過程中,時刻需要注意的事情,養細胞不難,也不易。要不污染,就全要靠你時時刻刻把“無菌操作”這四個字記在腦海里。好了,今天就策這么多了,祝你們心明眼亮。

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